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MOLECULAR IDENTIFICATION AND MORPHOLOGICAL CHARACTERIZATION OF ANISAKIS SPP. L3 LARVAE (NEMATODA: ANISAKIDAE) IN SCOMBER COLIAS GMELIN, 1789 (PERCIFORMES: SCOMBRIDAE) FROM NORTHERN ARGENTINA

 

IDENTIFICACIÓN MOLECULAR Y CARACTERIZACIÓN MORFOLÓGICA DE LARVAS L3 DE ANISAKIS SPP. (NEMATODA: ANISAKIDAE) EN SCOMBER COLIAS GMELIN, 1789 (PERCIFORMES: SCOMBRIDAE) DEL NORTE DE ARGENTINA

Autores: Thaissa Duarte Serrano; Larissa Sbeghen Pelegrini; Eder Tavares Santiago; Fernanda Dotti do Prado; Fabio Porto-Foresti; Rodney Kozlowisky de Azevedo & Vanessa Doro Abdallah

Localización: Neotropical Helminthology, 2017, 11(1), jan-jun: 25-36.

ABSTRACT

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We performed the molecular identification of nematode third-stage larvae parasites of Scomber colias Gmelin, 1789 collected on the northern coast of Argentina, and described the morphological and morphometric features of these parasites. Internal organs and muscles of 31 S. coliasspecimens were analyzed. The larvae genetic identification was performed by PCR-RFLP (Polymerase Chain Reaction - Restriction Fragment Length Polymorphism) using amplification of nuclear DNA fragment (ITS1, ITS2 and 5.8S) and cleavage with specific restriction enzymes (HinfI, HhaI) for identification. For morphological and morphometric analysis, the specimens were observed in trinocular microscopy and in scanning electron microscopy. About 369 nematodes were collected in 68% of the analyzed fishes. All parasites were in the internal organs of the host. No larval forms were detected in the muscles. The molecular characterization produced four different patterns: Anisakis pegreffii Campana-Rouget & Biocca, 1955; Anisakistypica (Diesing, 1860); a hybrid of Anisakisspp; and other larvae that showed no molecular patterns for Anisakis (Karl Rudolphi, 1809). Morphological-morphometric differences between A. pegreffii and A. typica larvae were observed. Except the larval tooth, all structures of A. pegreffii had much higher dimensions than those found in A. typica. In addition, the posterior end of A. pegreffii tapered more gradually and a mucron accompanied this tapering. In A. typica the posterior end is more robust and the mucron is very tapered. This is the first contribution to molecular identification with morphological characterization of Anisakisspp. in S. coliasfrom Argentina.

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Keywords: chub mackerel – fish parasites – genetic identification – polymerase chain reaction – South America – zoonotic potential

RESUMEN

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Se realizó la identificación molecular de larvas de nemátodos en el tercer estadío del Scomber colias Gmelin, 1789 recogidos en la costa norte de Argentina, y la caracterización morfológica y morfométrica de estos parásitos. Los órganos internos y los músculos de 31 muestras de S. colias fueron analizadas. La identificación genética de larvas se realizó por PCR-RFLP (Polymerase Chain Reaction - Restriction Fragment Length Polymorphism) mediante la amplificación de un fragmento de ADN nuclear (ITS1, ITS2 y 5,8S) y el escote con enzimas de restricción específicas (HinfI, HhaI) para la identificación. Para el análisis morfológico y morfométrico, los especímenes se observaron en el microscopio trinocular y en microscopía electrónica de barrido. Alrededor de 369 nematodos fueron recolectados en el 68% de los peces analizados. Todos los parásitos se encontraron en los órganos internos del huésped, y no se detectó formas larvarias en los músculos. La identificación molecular produjo cuatro diferentes patronesAnisakis pegreffii Campana-Rouget & Biocca, 1955; Anisakistypica (Diesing, 1860); un híbrido de Anisakisspp; y otras larvas que no muestran patrones moleculares correspondientes a Anisakis. Se observaron diferencias morfológicas y morfométricas entre las larvas de A. pegreffii y A. typica. Excepto el diente larvario, todas las estructuras de A. pegreffii tenían dimensiones mucho mayores que los encontrados en A. typica. Además, el extremo posterior de A. pegreffii se estrecha más lentamente y el mucrón acompaña esta conicidad. En A. typica el extremo posterior es más robusto y el mucrón es muy afilado. Esta es la primera contribución a la identificación molecular con la caracterización morfológica de Anisakisspp. en S. colias de Argentina.

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Palabras clave: caballa – parásitos de los peces – identificación genética – reacción en cadena de la polimerasa – América del Sur – potencial zoonótico

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